比索洛尔对高血压左室肥大大鼠心肌细胞GRK2表达的影响(2)

　　2.2 GRK2在心肌组织总蛋白中表达与6M-WKY相比，6M-SHR心肌组织中GRK2的表达无明显变化（P>0.05）。8M-SHR心肌组织中GRK2的表达显著增加，高于6M-SHR组和6M-WKY组（P<0.05）。比索洛尔干预后的8M-SHR-D组心肌组织中GRK2的表达显著减少，均低于8M-SHR组（P<0.05），但高于6M-SHR组和6M-WKY组（P<0.05）。详见表2。

　　表2 GRK2在心肌组织中的表达（x±s）

　　2.3 GRK2在心肌组织浆蛋白中的表达与6M-WKY组相比，6M-SHR组心肌组织浆蛋白中GRK2的表达无明显变化。8M-SHR组心肌组织浆蛋白中GRK2的表达显著增加，高于6M-SHR组（P<0.015）和6M-WKY组。8M-SHR-D组心肌组织浆蛋白中GRK2的表达显著减少，低于8M-SHR组

　　、6M-SHR组（P<0.05）。详见表2。

　　2.4 GRK2在心肌组织膜蛋白中的表达与6M-WKY相比，6M-SHR组心肌组织中GRK2的表达显著增加（P<0.05）。8M-SHR组心肌组织中GRK2的表达进一步增加，高于6M-SHR组和6M-WKY组（P<0.05）。8M-SHR-D组心肌组织中GRK2的表达显著减少，均低于8M-SHR组和6M-SHR组（P<0.05）。详见表2。

　　2.5 GRK2在心肌组织核蛋白中的表达 Western-Blot检测结果显示在分子量80 kDa处未见表达条带，提示左室心肌组织核蛋白匀浆中无GRK2的表达。

　　2.6 SHR大鼠左心室组织中GRK2表达的部位及亚细胞定位的变化荧光显微镜观察发现各组大鼠心肌细胞核内均基本无GRK2绿色荧光。发表文章随着月龄增加，心肌细胞膜（闰盘）GRK2荧光逐渐增强，其中8M的SHR中心肌细胞膜（闰盘）上荧光最强，比索洛尔干预后8M 的SHR-D荧光强度变弱。进一步证实GRK2在SHR左心室心肌细胞膜（闰盘）的聚积。

　　2.7 各组大鼠左心室重量与左心室组织蛋白中GRK2的相关性左心室重量和左心室心肌组织总蛋白匀浆GRK2水平（r=0.31；P=0.15）、浆蛋白匀浆GRK2水平（r=0.42；P=0.082）无明显线性相关，但与膜蛋白匀浆中GRK2水平（r=0.91；P<0.001）之间呈正相关。

　　3 讨论

　　高血压病心肌肥大是心肌细胞对多种病理刺激的一种适应性反应，涉及细胞内多条信号转导通路的复杂病理生理过程[1]。GRK2与心肌肥大的细胞信号转导通路有密切联系。

　　本研究发现6月龄、8月龄SHR左心室已出现GRK2在细胞膜（闰盘）聚积的表现，这与文献报道的一致[2-5]，随着月龄的增加，GRK2表达增加，且心肌组织总蛋白、浆蛋白和膜蛋白中GRK2，仅膜蛋白GRK2与左室组织呈正相关性。闰盘是调节肥大心肌纤维结构的重要信息交汇中心，细胞膜骨架结构上也存在多种细胞信号分子以及骨架蛋白，在GRK2和骨架蛋白相互作用的信号级联反应事件中发挥重要的作用。研究表明P38是种有丝分裂蛋白激活酶（MAPK），参与细胞纤维重塑，GRK2调控P38活化水平，进而影响P38介导的细胞内效应[6]。这表明GRK2表达的增强以及细胞膜上GRK2的聚积与心肌细胞内多种信号因子相互作用参与心肌肥大的信号转导。因此推测干预细胞中GRK2可能达到抑制心肌肥大的作用。

　　Philip等[7]报道敲除GRK2基因的大鼠不仅阻止在缺血后的心肌异常重塑，而且保存了对β受体的反应性，增强心肌收缩力。Scot等[8]也发现GRK2表达缺失的大鼠心肌对β受体激动剂的敏感性增强。Hideo等[9]对表达GRK2阻滞剂（βARKct）转基因鼠先予主动脉狭窄术处理后造成后负荷压力增高，结果发现βARKct表达越强，心脏结构重塑及功能恶化程度越弱，并且保持了腺苷酸环化酶（AC）的活力和心肌细胞膜上β受体的密度。这些研究表明心肌细胞重塑与GRK2下调心肌细胞膜上β受体的密度有关。

　　比索洛尔是一种选择性的β1受体阻滞剂，能上调β受体，在高血压、心肌肥大、慢性心力衰竭等方面有重要的价值，但其改善心肌重塑的机制目前尚不明了。β受体阻滞剂能改变GRK2的表达和活性，在慢性主动脉瓣反流的大鼠[4]等研究中均发现β受体信号传导途径受损，GRK2水平升高，β受体阻滞剂能上调β受体的密度和数量，降低GRK2水平；在人心衰研究发现β受体阻滞剂能影响右心耳中GRK2的水平[3]。但这些研究缺乏对心肌细胞亚细胞结构上GRK2的分析。比索洛尔可以抑制左室重塑，并且心肌组织中GRK2的表达减少，GRK2在细胞膜上易位减轻。原因可能为GRK2是一种细胞溶质的酶，由胞浆易位到细胞膜实现GPCRs受体信号调节的关键步骤，当受激动剂刺激后，实现GRK2的细胞膜易位[10]。因此抑制心肌细胞GRK2的表达，尤其是抑制GRK2易位于细胞膜上，可能是比索洛尔阻止心肌细胞的肥大机制之一。

　　GRK2参与心肌细胞肥大的信号转导，比索洛尔可能通过干预GRK2信号途径从而抑制心肌肥大。这从细胞和分子水平上为逆转左心室肥大提供了新的理论和实验依据，也为临床防治高血压左心室肥厚提供了新的防治思路。

　　参考文献：

　　[1] Petronila P，Cristina M，Catalina R，et al.Mechanisms of regulation of G protein-coupled receptor kinases （GRKs） and cardiovascular disease.Investig.Drugs 8 （1999）[J].Cardiovascular Research，2006，69：46-56.

　　[2] Leon H，Baczko I，Sawicki G，et al.Inhibition of matrix metalloproteinases prevents peroxynitrite induced contractile dysfunction in the isolated cardiac myocyte[J].Br J Pharmacol，2008，153：676-683.

　　[3] Leineweber K，Rohe P，Beilfuss A.G-protein-coupled receptor kinase activity in human heart failure：Effects of beta-adrenoceptor blockade[J].Cardiovasc Res，2005，66（3）：512-519.

　　论文榜（www.zglwb.com），是一个专门从事期刊推广、投稿辅导的网站。
本站提供如何投稿辅导，寻求投稿辅导代理，快速投稿辅导，投稿辅导格式指导等解决方案：省级投稿辅导/国家级投稿辅导/核心期刊投稿辅导//职称投稿辅导。


期刊鉴别	论文检测	免费论文	特惠期刊	学术答疑	发表流程

搜索

比索洛尔对高血压左室肥大大鼠心肌细胞GRK2表达的影响(2)