2.3纤维素酶法 选择纤维素酶法[7,11]的试验因素为加酶量、酶解温度、酶解时间、酶解pH值,每个因素设3个水平,选用L9(34)正交表进行试验。正交试验设计与结果见表2。 从表2可知,极差R大小为RA>RB>RC>RD,即对多糖得率影响因素的大小依次为加酶量、温度、时间与pH值。最佳提取条件为A3B3C2D3,即加酶量1.0%,提取温度60℃,提取时间60min,pH值6.0。按最佳提取条件进行验证试验,多糖得率为24.55%。 2.4果胶酶法 选择果胶酶法[12-13]的试验因素为加酶量、酶解温度、酶解时间、酶解pH值,每个因素设3个水平,选用L9(34)正交表进行试验。正交试验设计与结果见表3。 从表3可知,极差R大小为RC>RB>RD>RA,即对多糖得率影响因素的大小依次为时间、温度、pH值与加酶量。最佳工艺条件为A3B2C3D3,即加酶量1.0%,提取温度50℃,提取时间90min,pH值5.5。按最佳提取条件进行验证试验,测得多糖得率为24.81%。 2.54种提取方法的比较 比较以上4种提取法的当归多糖得率,纤维素酶法和果胶酶法所得多糖得率相近且较高,而热水浸提法和超声波法所得多糖得率相近且均较两种酶法低。热水浸提法用时最长为3h,超声波法用时最短为30min,而纤维素酶法和果胶酶法分别用时60min和90min。因此,纤维素酶法和果胶酶法得率较高,用时较少,条件温和因而能耗较低,为提取当归多糖的较佳选择。 3结论与讨论 经试验研究,得出在最佳工艺条件下,热水浸提法的多糖得率为21.78%,超声波法为22.15%,纤维素酶法为24.55%,果胶酶法为24.81%。酶法是当归多糖提取较佳的选择。纤维素酶法的最佳提取条件:加酶量1.0%,提取温度60℃,提取时间60min,pH值6.0。果胶酶法的最佳提取条件:加酶量1.0%,提取温度50℃,提取时间90min,pH值5.5。 与文献报道的其他原料中多糖的超声提取法[14-15]比较,本研究的超声波法并未显著提高多糖提取率,只是缩短了提取时间,热水浸提法用3h提取也可达与超声波法相近的提取率。而纤维素酶法和果胶酶法提取,则可将多糖得率比热水浸提法和超声波法提高约10%。说明酶法更适用于当归的多糖提取,这与文献结论一致,可能由于纤维素酶可以破坏植物细胞壁,果胶酶可以将果胶质水解,均可使多糖溶出增加。 参考文献: [1]胡小平,李玉云,李先何,等.当归多糖的成分及药理学研究新进展[J].中药材,2004,27(1):70-72. [2]汪诺舟,张阳德.当归多糖的药理作用与研究进展[J].中国现代医学杂志,2012,22(19):67-69. [3]孙元琳,杨萍芳,吴海霞,等.水法提取当归多糖工艺条件优化[J].中国食品学报,2009,9(5):130-134. [4]盛小莉,王凯平.正交设计优化当归多糖提取工艺[J].中成药,2008,30(12):1862-1864. [5]杨婧,李琴,林河春.当归多糖水提法正交设计及最佳Savag's法去蛋白工艺[J].安徽农业科学,2009,37(24):11532-11533. [6]何先元,许晋芳,王秋,等.当归多糖的超声提取及含量测定[J].中国药业,2010,19(19):34-35. [7]张新国,王强林,李春雷,等.当归多糖的酶法提取新工艺研究[J].中医药学报,2012,40(3):96-100. [8]李加林,刘霞,刘胜.微波辅助提取当归多糖的工艺研究[J].安徽农业科学,2012,40(34):16573-16574. [9]华南理工大学,大连轻工业学院,郑州轻工业学院,等.食品分析[M].北京:中国轻工业出版社,2006.
[10]中华人民共和国卫生部.GB/T5009.1~5009.100-2003食品卫生检验方法理化部分(一)[S].北京:中国标准出版社,2004. |