摘要：通过腹腔注射氧嗪酸钾人工复制小鼠急性高尿酸血症模型，研究复方肿节风颗粒对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响以及探索其降尿酸的机制。结果显示，与空白对照组相比，阳性对照组小鼠血清尿酸值极显著升高（P<0.01），表明应用氧嗪酸钾造模取得成功；与阳性对照组相比，复方肿节风颗粒高、中、低剂量组和别嘌醇对照组小鼠血清尿酸值均极显著降低（P<0.01），表明两药均有良好的降尿酸作用，且复方肿节风颗粒降尿酸作用呈一定的量效关系；各给药组小鼠肝脏匀浆中黄嘌呤氧化酶（XOD）活性与模型组相比，高、中剂量组显著降低（P<0.05），低剂量组差异不显著，提示复方肿节风颗粒降尿酸作用可能与降低XOD活性有关。

 

　　关键词：复方肿节风颗粒；高尿酸血症；黄嘌呤氧化酶

 

　　中图分类号：R965 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）04-0860-03

 

　　Effect of Compound Herba sarcandra Particles on Acute Hyperuricemia Mice

 

　　ZHONG Shu-hong1，HE Jia-kang1，HU Ting-jun1，SU Zi-jie1，LI Jing-ling1，SU Min1，YANG Shan-zhong2

 

　　（1.College of Animal Science and Technology， Guangxi University， Nanning 530005， China；

 

　　2.Guangxi BDX Animal Drugs Co. Ltd.， Nanning 530003， China）

 

　　Abstract： The effects of compound Herba sarcandra particles on serum uric acid level in mice with acute hyperuricemia induced potassium oxonate were studied by intraperitoneal injection. The results showed that the level of serum uric acid in positive control group was significantly Lower（P<0.01） than that of normal control group， indicating that potassium oxonate could be used to make a model of hyperuricemia. Compared with the positive control， the level of serum uric acid in four treatment groups were significantly lower（P<0.01）. It is indicated that compound Herba sarcandra particles and allopurinol were effective on decreasing uric acid. The compound Herba sarcandra particles had dose-effect. The activities of xanthine oxidase （XOD） in the liver homogenate of high-dose and medium-dose groups were significantly lower （P<0.05） than that of control group. It is indicated that the effects of compound Herba sarcandra particles on descending uric acid might be related with XOD activity decreasing.

 

　　Key words： compound Herba sarcandra particles； hyperuricemia； xanthine oxidase

 

　　痛风是一种嘌呤代谢紊乱的代谢性疾病，其主要的生化特性就是产生高尿酸血症。痛风反复发作可产生尿酸盐沉积，关节畸形和肾结石，具有较高的危害。化学药物在治疗痛风和高尿酸血症时，能不同程度地缓解高尿酸血症，控制病情发展，但是具有严重的不良反应，在一定程度上限制了其安全使用。从天然药物中寻找新型抗痛风和高尿酸血症药物依然是药学研究的一个热点，加强对痛风疾病防治药物的研究近年来日益重要。

 

　　复方肿节风颗粒以肿节风、射干、甘草为主要原料。处方中重用肿节风，取其祛风通络、活血化瘀、消肿散结之功效作为方中主药；取射干降火化痰、消肿散结之功效作为辅药；甘草调和诸药，兼具有清热化痰、缓急止痛之功，可使三药合用共奏清化痰浊，活血通络，消肿散结之功。本研究从药效学角度评价复方肿节风颗粒抗小鼠急性高尿酸血症的效果，以及探索该药物制剂降低尿酸的作用机制。

 

　　1 材料与方法

 

　　1.1 试验动物

 

　　SPF级昆明种小鼠110只，雄性，6周龄，体重（20±2） g，由广西医科大学实验动物中心提供，分笼饲养，自由饮水和进食。

 

　　1.2 药物与试剂

 

　　复方肿节风颗粒：广西大学与广西北斗星动物保健品有限公司联合研制，广西北斗星动物保健品有限公司中试生产（批号：20101201，规格：250 g/袋，1 g相当于原生药1.6 g）。

 

　　别嘌醇片：对照药物，重庆青阳药业有限公司生产（批准文号：国药准字H50021422）。试验用去离子水溶解，配制成终浓度为0.8 mg/mL混悬液。

 

　　氧嗪酸钾（批号：101240383，SIGMA-ALORICH），用0.8%羧甲基纤维素钠配制成终浓度为30 mg/mL混悬液。

 

　　尿酸（UA）检测试剂盒、黄嘌呤氧化酶（XOD）检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所。

 

　　1.3 主要仪器

 

　　微量离心机（SIGMA公司）；台式低速离心机（湖南凯达科学仪器有限公司）；电热恒温水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司）；旋涡混合器（林贝尔仪器制造公司）；紫外分光光度计（型号UA-1800，北京瑞利分析仪器公司）。

 

　　1.4 试验方法

 

　　1.4.1 复方肿节风颗粒对正常小鼠血清尿酸值的影响 50只小鼠随机分成5组，每组10只。分别为复方肿节风颗粒高、中、低剂量组，别嘌醇对照组，空白对照组。各给药组每天早上空腹灌胃给药，给药时间为5 d；空白对照组给予等量的灭菌生理盐水。第5天早上各组给药后1 h，小鼠眼球后静脉丛采血，室温条件下自然凝血，4 ℃静置过夜，3 500 r/min离心10 min，分离血清，按照试剂盒说明测定各组小鼠UA值。试验分组以及给药方案见表1。

 

　　1.4.2 复方肿节风颗粒对急性高尿酸血症小鼠的影响 参照国内外相关文献[1-4]，选用氧嗪酸钾为尿酸酶抑制剂，抑制小鼠体内尿酸酶活性，增高其血清尿酸（UA）水平，人工复制小鼠急性高尿酸血症模型。60只雄性昆明种小鼠随机分成6组，每组10只。分别为复方肿节风颗粒高、中、低剂量组，别嘌醇对照组，阳性对照组，空白对照组。阳性对照组和空白对照组每天上午空腹灌胃（ip）等量灭菌生理盐水，其余药物治疗组分别灌胃不同药物，连续用药5 d，最后1次灌胃给药前1 h，空白对照组腹腔注射（ig）灭菌生理盐水，剂量为每千克体重10 mL；其余各组腹腔注射氧嗪酸钾盐混悬液，剂量为每千克体重10 mL。各组灌胃给药1 h后小鼠眼球后静脉丛采血，室温条件下自然凝血，4 ℃静置过夜，3 500 r/min离心10 min，分离血清，按照试剂盒说明测定小鼠血清UA值；取肝脏制成10%组织匀浆，取上清液按照试剂盒说明测定肝脏中XOD活性。试验分组以及给药方案见表2。

 

　　1.4.3 数据处理 试验结果以均值±标准差（M±SD）表示，采用SPSS 17.0统计分析软件进行数据处理，采用单因素方差（ANOVA）分析，用Duncan法进行多重比较。

 

　　2 结果与分析

 

　　2.1 复方肿节风颗粒对正常小鼠血清UA值的影响

 

　　复方肿节风颗粒对正常小鼠血清UA值的影响结果见表3。由表3可见，各给药组小鼠血清UA值与空白对照组相比，别嘌醇对照组极显著降低（P<0.01），高剂量组显著降低（P<0.05），中、低剂量组差异不显著。这表明复方肿节风颗粒在一定程度上具有降低正常小鼠血清UA值的作用。

 

　　2.2 复方肿节风颗粒对急性高尿酸血症小鼠的影响

 

　　2.2.1 复方肿节风颗粒对急性高尿酸血症小鼠血清UA值的影响 复方肿节风颗粒对急性高尿酸血症小鼠血清UA值的影响结果见表4。由表4可见，与空白对照组相比，阳性对照组小鼠血清UA值极显著升高（P<0.01），表明本研究人工复制小鼠急性高尿酸血症模型成功；各给药组小鼠血清UA值与阳性对照组相比，均极显著降低（P<0.01），表明复方肿节风颗粒能很好的降低急性高尿酸血症小鼠血清UA值，且其降尿酸作用呈一定的量效关系。

 

　　2.2.2 复方肿节风颗粒对急性高尿酸血症小鼠肝脏中XOD活性的影响 复方肿节风颗粒对急性高尿酸血症小鼠肝脏中XOD活性的影响结果见表5。由表5可见，与空白对照组相比，阳性对照组小鼠肝脏中XOD活性差异不显著；各给药组小鼠肝脏中XOD活性与阳性对照组比较，别嘌醇对照组极显著降低（P<0.01），高、中剂量组显著降低（P<0.05），低剂量组差异不显著。

 

　　3 小结与讨论

 

　　家禽痛风是一种蛋白质代谢障碍引起的高尿酸血症，系禽体内尿酸产生过多或排泄障碍导致机体血尿酸水平急剧升高，进而尿酸盐沉积在关节囊、软骨、胸、腹腔等各内脏器官表面或者其他组织中的一种代谢性疾病[5，6]。各日龄段家禽均可发生，尤以集约化养殖场产蛋鸡的发病率更高，病鸡瘦弱，生产性能下降，给养殖户带来较大的经济损失。目前对家禽痛风的治疗办法不多，疗效也不够满意[7]。引起体内尿酸升高主要有两个原因：一是体内尿酸生成增加，二是体内尿酸排泄障碍。氧嗪酸钾是一种尿酸酶抑制剂，作为化学诱导剂可以抑制尿酸的分解，增加机体内血清尿酸水平，从而造成动物的高尿酸血症模型[3]。该方法具有操作简单、重复性好等特点，在国际上已经普遍用此模型评价药物的抗高尿酸血症以及痛风作用[1，8，9]。

 

　　黄嘌呤氧化酶（XOD）是一种氧化还原酶，广泛存在于各种生物体内，以肝脏中含量最多[10]，在嘌呤代谢中起着非常重要的作用，其在体内的代谢路径为：非嘌呤类前体物质在生物体内经过一系列复杂的生物转化生成嘌呤类核苷酸黄嘌呤、次黄嘌呤，进一步分解生成次黄嘌呤和黄嘌呤，最后经过黄嘌呤氧化酶的连续氧化最终生成尿酸[3，11]。因此，机体内黄嘌呤氧化酶的活性大小直接调控着体内尿酸水平的高低。本试验结果表明，高剂量的复方肿节风颗粒和别嘌醇都能极显著地降低急性高尿酸血症小鼠体内血清尿酸值，且都能极显著地抑制小鼠肝脏匀浆中XOD活性；中、低剂量均可将急性高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平恢复至正常，且中剂量显著地抑制急性高尿酸血症肝脏匀浆中XOD活性，低剂量组的XOD活性与空白对照组差异显著，以上表明复方肿节风颗粒具有很好的降尿酸作用，其降尿酸的强度具有一定的量效关系，并且其降尿酸的作用机制可能与其抑制XOD活性有关。

 

　　参考文献：

 

　　[1] 喻志峰，杨 澄，仇 熙，等. 瑞香苷对高尿酸血症小鼠的影响[J]. 中国药科大学学报，2002（2）：64-67.

 

　　[2] IRIS H H， SCOVILLE J P， DAVIDE J， et al. Substituted cyclicimides as potencial anti-gout agents[J]. Life Sciences，1990，46（26）：1923-1927.

 

　　[3] 曹瑞竹，张三印，代 勇，等. 秦皮总香豆素降低小鼠急性高尿酸血症血尿酸水平及机理研究[J]. 辽宁中医杂志，2010（2）：362-363.

 

　　[4] KONG L D. Aesculin possesses potent hypouricemic action in rodents but is devoid of xanthine oxidase dehydrogenase inhibitory activity[J]. Planta Medica，2002，68（2）：175.

 

　　[5] 贾志江，杨红梅，刘娣琴. 家禽痛风的病因分析及防治[J].畜牧兽医杂志，2011（6）：123-124.

 

　　[6] 蒋增海，陈 益，娄 飞，等.家禽痛风病的诊断与防治[J].中国畜牧兽医，2007（1）：137-138.

 

　　[7] 闫永平，胡建军.家禽痛风的发生与防治[J].中国家禽，2005（9）：26.

 

　　[8] CARROLL J J，HOLLY C， ROBERTA D. A simplified alkaline phosphoungstate assay for uric acid in serum[J]. Clinical Chemistry，1997，17（3）：158-160.

 

　　[9] STAVRIC B，CLAYMAN S，GADD R E，et al. Some in vivo effects in the rat induced by chlorprothixene and potassium oxonate[J]. Pharmacological Research Commuication，1975，7（2）：117-124.

 

　　[10] WANG X， WANG C P， HU Q H， et al. The dual actions of Sanmiaowan as a hypouricemic agent： down-regulation of hepatic XOD and renal mURAT1 in hyperuricemic mice[J]. Journal of Ethnopharmacol，2010，128（1）：107-115.

 

　　[11] 梁晓萍，梁琼麟，胡 坪，等. 高尿酸血症与痛风研究进展[J]. 中国药理学通报，2008（10）：1265-1268.