一种抗真菌抗生素发酵工艺优化及稳定性研究(2)

　　２．３抗生素稳定性分析。

　　１）热稳定性试验数据显示，当离心分离后的发酵液处于９５℃高温处理１０、３０、６０、１２０ｍｉｎ时，所对应的抗生素对指示菌所产生的抑菌圈直径分别为２．１６、２．１３、１．９６、１．８９、１．７６ｃｍ。以上数据表明，该抗生素在９５℃条件下随时间的延长，抑菌效价的下降并不明显，常温下抑菌直径为２．１６ｃｍ，即使９５℃高温处理１２０ｍｉｎ，抑菌圈直径仍有１．７６ｃｍ，说明该抗生素对热具有较高的稳定性。试验过程发现，该发酵上清液在高温下出现混浊现象，主要是蛋白质等物质发生了变性并沉淀，预示可以采用高温法去除发酵液中的部分蛋白质等物质。

　　２）抗生素在酸、中、碱性环境中的稳定性试验数据显示，发酵液处于原液状态时该抗生素对指示菌的抑菌圈直径为２．１４ｃｍ，当改变发酵液ｐＨ为４、７、９时，抑菌圈直径分别为２．１１、２．１０、０．８０ｃｍ。以上数据表明，当发酵上清液的ｐＨ为酸性和中性时，虽经高温处理，但该抗生素的抑菌效价变化很微小；而当发酵上清液的ｐＨ为碱性时，该抗生素效价急剧下降，抑菌圈直径由原液的２．１４ｃｍ下降到０．８０ｃｍ，说明该抗生素在酸性和中性环境中比较稳定，而在碱性环境中不稳定。试验过程发现，当发酵上清液在酸性条件下高温处理１０ｍｉｎ后，溶液浊度要大于其他条件；当处于中性条件时，发酵上清液与其他条件相比最清澈，这个现象可能与发酵液中的蛋白质变性有关，而且这些蛋白质在酸性条件下更易变性。这种现象预示着在对发酵液进行预处理时，可以通过改变其酸度来达到除去部分蛋白质的目的。

　　３小结与讨论

　　本试验对筛选获得的一株产抗真菌抗生素的菌株进行了初步研究。菌落和细胞形态的观察发现，该菌株与链霉菌属相似，斜面培养至６ｄ菌株完全成熟。采用正交试验设计法对该菌株的发酵工艺进行了优化，确定了最佳发酵工艺条件：葡萄糖１５ｇ／Ｌ，酵母液４０ｇ／Ｌ，装液量３０ｍＬ／２５０ｍＬ，发酵时间７２ｈ。抗生素稳定性试验发现，该抗生素具有较高的耐热性，并在酸性和中性环境下具有相对较高的抑菌活性，表明该菌具有一定的应用潜力。今后将通过系统分类学方法进一步明确该菌株的种属关系，全面研究该抗生素分离纯化工艺及其理化性质。

　　参考文献

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　　［３］ＧＲＡＮＩＥＲＦ．Ｉｎｖａｓｉｖｅｆｕｎｇａｌｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．eｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙａｎｄｎｅｗｔｈｅｒａｐｉｅｓ［Ｊ］．ＰｒｅｓｓｅＭｅｄ，２０００，２９（３７）：２０５１－２０５６．

　　［４］刘自贵，裘雁秋，谭明珍．院内真菌感染及其药物的敏感性分析［Ｊ］．华西医学，２０００，１０（４）：３０４－３０５．

　　［５］沈萍，范秀容，李广武．微生物学实验［Ｍ］．北京：高等教育出版社，１９９９．

　　［６］赵斌，何绍江．微生物学实验［Ｍ］．北京：科学出版社，２００２．

　　［７］任董春．浅谈抗生素微生物检定—管碟法操作注意要点［Ｊ］．安徽医药，２００３，７（３）：２３０．

　　［８］正交试验法编写组．正交试验法［Ｍ］．北京：国防工业出版社，１９７６．

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