根据上述试验的优化结果，随机选取Me6与Em引物组合来对0份芒果种质的DNA进行扩增，以进一步验证该扩增反应体系的效果。由图3可以看出，引物Me6与Em不但对0份芒果种质均能扩增出较好的条带，而且也存在着很明显[CM（25]的多态性条带，由此说明所优化的扩增体系比较可靠，适合芒果种质的SRA分析研究。 

　　3结论与讨论 

　　CR反应体系的优化方法主要有3种：单因素试验、均匀试验和正交试验优化。正交试验设计相对单因素试验而言具有试验次数较少、效用明确且能较快地获得极佳的试验结果的特点，避免了单一因素试验结果的不足。目前，正交试验设计已成功应用于枣、价廉草、花生、番石榴等植物的 SRA-CR 反应体系优化[7]，但在芒果上还未曾见报道。本试验通过正交设计，对影响芒果SRA 反应体系的模板DNA含量、引物浓度、2×Taq CR Master Mix含量进行了优化，建立了适用于芒果的最优SRA反应体系，即25μL反应体系中包含30 ng 模板DNA、03μmol/L 引物、0μL 2×Taq CR Master Mix。同时，在00个引物组合中，共得到多态性引物组合36个。该反应体系及36个多态性引物组合可用于芒果种质遗传多样性分析、系统发育和育种应用等方面，同时也为芒果品种鉴定、亲缘关系分析及优良新品种的选育等提供技术参考。 

　　影响SRA-CR反应的因素相对复杂，不同植物适应的SRA 反应体系不同，且各因素之间存在着相互效应，只有各因子之间的浓度配比达到最佳状态时才能得到稳定、可重复的扩增结果。因此，SRA标记应用到不同物种上时需要优化反应体系和条件。在芒果SRA 体系优化的过程中，发现DNA模板含量、2×Taq CR Master Mix含量及引物浓度等均会影响SRA扩增效果，但模板DNA含量对扩增无明显影响（20～60 ng 之间均有稳定的扩增），这与其他学者的研究结果相似[2，8-0]。可见，对芒果SRA 反应条件进行优化是非常必要的。 

　　[HS2][HT85H]参考文献：[HT8SS] 

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