***杀菌剂对*****的室内毒力测定

　草莓（Fragaria ananassa Duchesne）有“果中皇后”之称，营养丰富，经济价值很高。自1931年首次报道草莓炭疽病以来，已有多国报道该病的发生，其广泛的传播性和潜在危害已被广泛关注[1]。高温湿润的气候条件适宜该病发生。因此，其对7～8月份草莓生产苗繁育造成的损失尤为严重。我国于1997年由叶正文等[2]首次发现草莓炭疽病，湖北省该病发生越来越重，严重阻碍了草莓产业的发展，尤其是在高温多湿的育苗季节更为严重。目前对该病害的研究主要有叶正文等[2]对抗病品种筛选、龙军等[3-9]对该病原菌生物学特性的研究等，针对防治该病害的农药筛选研究很少。作者力求筛选出对草莓胶孢炭疽病病菌毒力大、抑菌效果好的杀菌剂供生产上使用。因此试验选用13种杀菌剂作为供试药剂，采用菌丝体生长速率法对草莓胶孢炭疽病病菌进行室内毒力测定，以期筛选出对草莓胶孢炭疽病病菌毒力强的杀菌剂，为防治草莓炭疽病提供参考。
　　1 材料与方法
　　1.1 供试菌株
　　草莓炭疽病病原菌来源于湖北省农业科学院经济作物研究所分离，并通过分子鉴定保存的炭疽病病原胶孢炭疽菌[Colletotrichum gloeosporioides （Penz.） Sacc][10]，经过单孢纯化后获得供试菌株。
　　1.2 供试药剂
　　经预备试验筛选出以下几种药剂做药效测定（表1）。
　　1.3 杀菌剂室内毒力测定
　　采用杀菌剂室内生长速率法测定[10]。上述药剂均用无菌水配制成系列浓度梯度的溶液，在无菌操作台上将不同梯度的药剂加入到灭过菌的冷却到40～50 ℃的PDA培养基中，倾入后立即水平方向平稳摇动三角瓶，使药剂在培养基中均匀分布后倒平板。在每个平板中央接入一块直径为0.5 cm的菌苔，以不加药剂为空白对照。25 ℃恒温黑暗培养6 d后用“垂直十字交叉法”测量菌落直径，检查药剂的抑菌效果，每处理5皿，重复3次。
　　将PDA培养基放入121 ℃高压灭菌20 min。按每个三角瓶分装60 mL。分装后放在无菌操作台上，用移液枪移入被稀释后的不同浓度的农药，并摇匀。然后快速将其分别倒入3个培养皿中。每个培养皿倒入20 mL，待其冷却凝固后在培养皿左上方贴标签纸标记（预备做农药抑菌试验的农药的编号），然后用打孔器将供实验菌打孔，移入培养皿内[4]。然后将培养皿倒置于培养箱中，25 ℃恒温黑暗培养6 d，观察并测定抑菌圈直径。检查药剂的抑菌效果，每处理3皿，重复3次。通过十字交叉法对抑菌圈的大小进行测定。
　　抑菌率=■×100%
　　将药剂对菌丝的抑制率转换成几率值（y），药剂各浓度（mg/L）转换成对数值（x），进行线性回归分析，求出毒力回归方程和相关系数，最后计算出各药剂对病菌菌丝生长的抑制中浓度（EC50）。
　　1.4 数据分析
　　试验数据的分析均用SPSS 11.5和Excel 2003完成......

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